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本篇帶你了解一下多肽合成儀的運行原理
點擊次數:252 發布時間:2022-12-19
  多肽固相合成技術的發明同時促進了肽合成的自動化。第一臺真正意義上的多肽合成儀出現在1960年代末至1970年代初期,它是利用氮氣鼓泡來對反應物進行攪拌,用計算機程序控制來實現有限度的自動合成。即為后來總結歸納出的第一代多肽合成儀。
 
  雖然在攪拌方式和其他各項功能方面有著明顯的缺陷,但是它畢竟把人從實驗室里解放出來,極大地提高了工作效率,所以受到了多肽科學家的一致贊揚。
 
  多肽合成儀以固相合成為反應原理,在密閉的防爆玻璃反應器中使氨基酸按照已知順序(序列,一般從C端-羧基端 向 N端-氨基端)不斷添加、反應、合成,操作最終得到多肽載體。
 
  固相合成法,大大的減輕了每步產品提純的難度。為了防止副反應的發生,參加反應的氨基酸的側鏈都是保護的。羧基端是游離的,并且在反應之前必須活化。
 
  固相合成方法有兩種,即Fmoc和tBoc。由于Fmoc比tBoc存在很多優勢,現在大多采用Fmoc法合成,但對于某些短肽,tBoc因其產率高的優勢仍然被很多企業所采用。
 
  具體合成由下列幾個循環組成:
 
  1) 去保護:Fmoc保護的柱子和單體必須用一種堿性溶劑(piperidine)去 除氨基的保護基團。
 
  2) 激活和交聯:下一個氨基酸的羧基被一種活化劑所活化?;罨膯误w與游離的氨基反應交聯,形成肽鍵。在此步驟使用大量的超濃度試劑驅使反應完成。循環:這兩步反應反復循環直到合成完成。
 
  3) 洗脫和脫保護:多肽從柱上洗脫下來,其保護基團被一種脫保護劑(TFA) 洗脫和脫保護。

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